色譜填料技術(shù)又稱層析分離技術(shù)或色層分離技術(shù)，是一種分離復雜混合物中各個組分的有效方法。它是利用不同物質(zhì)在由固定相和流動相構(gòu)成的體系中具有不同的分配系數(shù)，當兩相作相對運動時，這些物質(zhì)隨流動相一起運動，并在兩相間進行反復多次的分配，從而使各物質(zhì)達到分離。
如今，色譜技術(shù)廣泛應用于工業(yè)中尤其是食品藥品行業(yè)，高效液相色譜也逐漸成為了食品藥品實驗室檢測部門的標配。在制藥行業(yè)，色譜層析制備柱也成了抗體、糖蛋白、抗生素等產(chǎn)品主要的生產(chǎn)設(shè)備。
色譜填料的選擇要點有哪些呢？
一、硅膠基質(zhì)填料
硅膠是HPLC填料普遍的基質(zhì)。除了具有無機物基質(zhì)共有的高強度，還提供了一個表面，可以通過成熟的硅烷化技術(shù)鍵合范圍很廣的配基，制成反相、離子交換、疏水作用、親水作用或分子排阻色譜。硅膠基質(zhì)填料適用廣泛的溶劑，從極性到非極性。
1、正相色譜
正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica)以及其它具有極性官能團,如胺基團(NH2,APS)和氰基團(CN,CPS)的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其它極性基團極性較強，因此，分離的次序是依據(jù)樣品中各組份的極性大小，即極性較弱的組份先被沖洗出色譜柱。
2、反相色譜
反相色譜用的填料常是以硅膠為基質(zhì)，表面鍵合有極性相對較弱的官能團的鍵合相。反相色譜所使用的流動相極性較強，通常為水、緩沖液與甲醇、乙腈等的混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強的組份先被沖洗出，而極性弱的組份會在色譜柱上有更強的保留。
二、聚合物填料
聚合物填料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂等，其優(yōu)點是在PH值為1～14均可使用。相對于硅膠基質(zhì)的C18填料，這類填料具有較強的疏水性，而且大孔的聚合物對蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效。
三、其它無機填料
其它HPLC的無機填料色譜柱也已經(jīng)商品化由于其特殊的性質(zhì)，一般僅限于特殊的用途。如，石墨化碳黑正逐漸成為反向色譜柱填料。這種填料的分離不同于硅膠基質(zhì)烷基鍵合相，石墨化碳的表面即是保留的基礎(chǔ)，不再需其它的表面改性。該柱填料一般比烷基鍵合相硅膠或多孔聚合物填料的保留能力更強。
好了，以上便是關(guān)于色譜填料的相關(guān)內(nèi)容介紹了。
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